Исследование субпопуляций лимфоцитов, расширенная панель (subpopulations of lymphocytes in human peripheral blood) в Москве

Метод исследования

• Проточная цитометрия

Исследование включает определение количества и соотношения субпопуляций лимфоцитов (CD3, CD4, CD8, CD19, CD16CD56, CD3+CD56+, CD3-CD56+), иммунорегуляторного индекса (CD4/CD8), определение маркеров активации лимфоцитов (CD3+HLA-DR+, CD3-HLA-DR+, CD95+, CD8+CD38+, CD38+, CD3+CD25+).

С помощью данного анализа оценивают функциональное   состояние лимфоцитов по наличию на их поверхности CD-рецепторов (cluster of differentiation, кластеров дифференцировки). Этим рецепторам присвоены определенные номера, которые помогают определить тип клетки (Т-лимфоциты, В-лимфоциты, NK), оценить их зрелость и активность.

Показатель	Клетки, несущие рецептор и выполняемые ими функции
CD3+CD19-	Зрелые Т-лимфоциты - общее количество. Интегральный  показатель Т-клеточного звена иммунитета.
CD3+CD4+	Т-хелперы (от англ. «to help» – помогать) - главные регуляторные клетки иммунного ответа, продуцируют разные цитокины: интерлейкины, интерфероны, фактор некроза опухоли. Влияют на направление   и эффективность иммунного ответа.
CD3+CD8+	Цитотоксические Т-лимфоциты (ЦТЛ) активны в отношении клеток (атипичных, инфицированных) с измененным рецептором MHC I.
CD3+CD4+/  CD3+CD8+	Иммунорегуляторный индекс – соотношение Т-хелперов и ЦТЛ. По отклонению показателя можно судить о наличии иммунодефицита, предположить направление иммунного ответа в сторону аутоиммунных состояний или аллергопатологии.
CD3+HLA-DR+	Активированные Т-лимфоциты с маркером поздней и длительной активации клеток.
CD3-HLA-DR+	В-лимфоциты и NK клетки, экспрессирующие HLA-DR+.
CD3-CD19+	В-лимфоциты - предшественники плазматических клеток, продуцирующих белки-иммуноглобулины.
CD3-CD16+CD56+	Натуральные/естественные киллеры - общее количество. Из них: CD16+ клетки с цитотоксической активностью (распознают опухолевые и инфицированные клетки (в отличие от CD8+ не требуют для распознавания измененный MHC I рецептор) и CD56+ клетки цитокин-продуцирующие.
CD3-CD56+	NK-клетки, активные продуценты IFNγ и других цитокинов.
CD3+CD56+	Т-лимфоциты, экспрессирующие маркер NK-клеток (CD56).
CD95+	Лимфоциты, экспрессирующие маркер активации апоптоза CD95+ (FAS/APO-1).
CD45+CD8+CD38+	Активированные цитотоксические T-лимфоциты,  экспрессирующие CD38+ , % от всех лимфоцитов.
CD3+ CD8+CD38+	Активированные T-лимфоциты,  экспрессирующие CD38+, % от  цитотоксических T-лимфоцитов.
CD3+CD25+	Маркер ранней активации Т лимфоцитов (включая Т-reg), является ɑ-цепью рецептора к интерлейкину -2.

Анализ маркеров активации лимфоцитов проводят в комплексе с оценкой клинической картины заболевания. Сдвиги в иммунограмме могут присутствовать на различных стадиях патологических процессов и их интерпретация будет различной. Значение для интерпретации имеют сопутствующие заболевания, возраст пациента, принимаемые лекарства, данные других лабораторных исследований.

При оценке показателей иммунного статуса необходимо помнить:

• Первичная оценка состояния иммунной системы наиболее информативна при комплексном обследовании, дефекты отдельных показателей могут компенсироваться усиленным функционированием других. Для оценки иммунного статуса рекомендуется оценить: субпопуляции лимфоцитов, иммуноглобулины (IgА, IgМ, IgG), фагоцитарную активность лейкоцитов, с одновременным исследованием общего клинического анализа крови с лейкоцитарной формулой;
• более высокую значимость имеют соотношения популяций  клеток (%), чем абсолютные значения;
• диагностически значимы отклонения показателей от референсных значений на 20% и более;
• в прогностическом отношении после проведения терапии информативен анализ иммунологических показателей в динамике;
• неблагоприятным признаком при наличии выраженного воспалительного процесса является отсутствие сдвигов или их несоответствие (чрезмерно выраженное или недостаточно сильное).

Снижение количества лимфоцитов может указывать на недостаточность клеточного звена иммунитета, повышение количества клеток и маркеров активации может отмечаться на фоне инфекционного процесса, лимфопролиферативных заболеваний, гормонального дисбаланса, гиперактивности иммунной системы при аутоиммунных и аллергических заболеваниях. 

Изменения в иммунограмме на фоне воспаления могут отсутствовать:

• при локальных процессах, в которые вовлечена система местного иммунитета (например, слизистые); 
• при небольшом объеме поражения, не вызывающем сильной ответной реакции;
• при низкой иммуногенности (например, в начале онкопроцесса).

Показания к исследованию:

• инфекции с необычно тяжелым течением, резистентные к терапии, часто рецидивирующие, вялотекущие, вызванные атипичными или микстом возбудителей, склонные к генерализации. 
• аллергические заболевания с необычно тяжелым течением, резистентные к терапии: бронхиальная астма, атопический дерматит. 
• аутоиммунные заболевания с необычно тяжелым течением, резистентные к терапии: псориаз, ревматоидный артрит, системная красная волчанка, рассеянный склероз, склеродермия, дерматомиозит, неспецифический язвенный колит, аутоиммунный тиреоидит. 
• опухолевые процессы в иммунной системе: лимфомы, лимфолейкозы.
• оценка эффективности терапии;
• мониторинг течения заболевания.

В исследовании субпопуляций лимфоцитов, расширенная панель определяются следующие параметры:

Параметры:

• CD3⁺CD19^- (Т-лимфоциты)
• CD3⁺CD4⁺ (Т-хелперы)
• CD3⁺CD8⁺ (Т-цитотокс. лимфоциты)
• CD3⁺CD4⁺/CD3⁺CD8⁺ (Иммунорегуляторный индекс (Т-хелперы/Т-цитоток.))
• CD3^-CD19⁺ (В-лимфоциты)
• CD3⁺HLA^-DR⁺ (Активир. Т-лимф.)
• HLA^-DR⁺ (Фенотип лимфоцитов)
• CD3^-CD16⁺CD56⁺ (NK-клетки общие)
• CD3⁺CD56⁺ (Актив.Т-клетки с маркерами NK-клеток)
• CD45⁺CD3^-CD56⁺ (Фенотип NK-клеток)
• CD95⁺,(FAS/APO-1) (Маркер актив.лимф)
• CD45⁺CD8⁺CD38⁺ (Актив.цитоток.Т-лимф)
• CD38⁺ (Маркер актив.Т-цитоток.лимф)
• CD45⁺CD3⁺CD25⁺ (Маркер ранней актив.Т-лимф)