Исследование субпопуляций лимфоцитов, минимальная панель (subpopulations of lymphocytes in human peripheral blood) в Москве

Метод исследования

• Проточная цитометрия

Исследование включает определение количества и соотношения основных субпопуляций лимфоцитов (CD3, CD4, CD8, CD19, CD16CD56, CD3+CD56+), иммунорегуляторного индекса (CD4/CD8), маркеров активации (CD3+HLA-DR+, HLA-DR+).

С помощью данного анализа оценивают клеточный состав  лимфоцитов крови по наличию на их поверхности CD-рецепторов (cluster of differentiation, кластеров дифференцировки). Этим рецепторам присвоены определенные номера, которые помогают определить тип клетки (Т-лимфоциты, В-лимфоциты, NK), стадию развития и функциональное   состояние.

Показатель	Клетки, несущие рецептор и выполняемые ими функции
CD3+CD19-	Зрелые Т-лимфоциты - общее количество. Интегральный  показатель Т-клеточного звена иммунитета.
CD3+CD4+	Т-хелперы (от англ. «to help» – помогать) - главные регуляторные клетки иммунного ответа, продуцируют разные цитокины: интерлейкины, интерфероны, фактор некроза опухоли. Влияют на направление   и эффективность иммунного ответа.
CD3+CD8+	Цитотоксические Т-лимфоциты (ЦТЛ) активны в отношении клеток (атипичных, инфицированных) с измененным рецептором MHC I.
CD3+CD4+/  CD3+CD8+	Иммунорегуляторный индекс – соотношение Т-хелперов и ЦТЛ. По отклонению показателя можно судить о наличии иммунодефицита, предположить направление иммунного ответа в сторону аутоиммунных состояний или аллергопатологии.
CD3+HLA-DR+	Активированные Т-лимфоциты с маркером поздней и длительной активации клеток.
CD3-HLA-DR+	В-лимфоциты и NK клетки, экспрессирующие HLA-DR+.
CD3-CD19+	В-лимфоциты - предшественники плазматических клеток, продуцирующих белки-иммуноглобулины.
CD3-CD16+CD56+	Натуральные/естественные киллеры - общее количество. Из них: CD16+ клетки с цитотоксической активностью (распознают опухолевые и инфицированные клетки (в отличие от CD8+ не требуют для распознавания измененный MHC I рецептор) и CD56+ клетки цитокин-продуцирующие.
CD3+CD56+	Т-лимфоциты, экспрессирующие маркер NK-клеток (CD56)

Анализ субпопуляций лимфоцитов проводят в комплексе с оценкой клинической картины заболевания (сдвиги в иммунограмме могут присутствовать на разных стадиях патологических процессов и их интерпретация будет различной). Значение для интерпретации имеют сопутствующие заболевания, принимаемые лекарства, данные других лабораторных исследований. 

При оценке показателей иммунного статуса необходимо помнить:

• комплексный анализ иммунограммы более информативен, чем оценка отдельных показателей (дефекты отдельных показателей могут компенсироваться усиленным функционированием других). Для оценки иммунного статуса рекомендуется оценить: субпопуляции лимфоцитов, иммуноглобулины (IgА, IgМ, IgG), фагоцитарную активность лейкоцитов, с одновременным исследованием общего клинического анализа крови с лейкоцитарной формулой;
• более высокую значимость имеют соотношения популяций  клеток (%), чем абсолютные значения;
• диагностически значимы отклонения показателей от референсных значений на 20% и более;
• в прогностическом отношении после проведения терапии информативен анализ иммунологических показателей в динамике;
• неблагоприятным признаком при наличии выраженного воспалительного процесса является отсутствие сдвигов или их несоответствие (чрезмерно выраженное или недостаточно сильное).

Снижение количества Т-лимфоцитов может указывать на недостаточность клеточного звена иммунитета, повышение может отмечаться на фоне инфекционного процесса, лимфопролиферативных заболеваний, гормонального дисбаланса, гиперактивности иммунной системы при аутоиммунных и аллергических заболеваниях.

Изменения в иммунограмме на фоне воспаления могут отсутствовать:

• при локальных процессах, в которые вовлечена система местного иммунитета (например, слизистые); 
• при небольшом объеме поражения, не вызывающем сильной ответной реакции;
• при низкой иммуногенности (например, в начале онкопроцесса).

Показания к исследованию:

инфекции с необычно тяжелым течением, резистентные к терапии, часто рецидивирующие, вялотекущие, вызванные атипичными или микстом возбудителей, склонные к генерализации; 

• часто рецидивирующий герпес; 
• рецидивы ВПЧ после деструкции;
• ВИЧ; 
• частые  и длительные ОРВИ; 
• грибковые поражения кожи и слизистых; 
• плохо заживающие раны;
• инфекции кожи/подкожной клетчатки: фурункулез, абсцессы, флегмоны, парапроктиты; 
• хронические инфекции ЛОР-органов: тонзиллит, фарингит, гнойные синуситы, отиты;
• частые и длительные бронхиты, пневмонии; 
• хронические урогенитальные инфекции (цистит, пиелонефрит); 
• афтозный стоматит и заболевания пародонта; 
• рецидивирующие гнойные конъюнктивиты;
• повторные лимфадениты; 
• длительный субфебрилитет; 
• частый/длительный лейкоцитоз, лейкопения.

аллергические заболевания с необычно тяжелым течением, резистентные к терапии: бронхиальная астма, атопический дерматит; 

аутоиммунные заболевания с необычно тяжелым течением, резистентные к терапии: псориаз, ревматоидный артрит, системная красная волчанка, рассеянный склероз, склеродермия, дерматомиозит, неспецифический язвенный колит, аутоиммунный тиреоидит; 

опухолевые процессы в иммунной системе: лимфомы, лимфолейкозы;

оценка иммунотропной терапии. 

Проводится врачом c учетом клинических проявлений заболевания и данных анамнеза.

В исследовании субпопуляций лимфоцитов, минимальная панель определяются следующие параметры:

Параметры:

• CD3⁺CD19^- (Т-лимфоциты)
• CD3⁺CD4⁺ (Т-хелперы)
• CD3⁺CD8⁺ (Т-цитотокс. лимфоциты)
• CD3⁺CD4⁺/CD3⁺CD8⁺ (Иммунорегуляторный индекс (Т-хелперы/Т-цитоток.))
• CD3^-CD19⁺ (В-лимфоциты)
• CD3⁺HLA^-DR⁺ (Активир. Т-лимф.)
• HLA^-DR⁺ (Фенотип лимфоцитов)
• CD3^-CD16⁺CD56⁺ (NK-клетки общие)
• CD3⁺CD56⁺ (Актив.Т-клетки с маркерами NK-клеток)